DELLA Proteinen sinn konservéiert MeeschterWuesstem reeglerdéi eng zentral Roll bei der Kontroll vun der Planzeentwécklung spillen als Äntwert op intern an Ëmweltstécker. DELLA handelt als Transkriptiounsregulator a gëtt rekrutéiert fir Promoteuren ze zielen andeems se un Transkriptiounsfaktoren (TFs) an Histon H2A duerch säi GRAS Domain binden. Rezent Studien hu gewisen datt d'DELLA Stabilitéit post-translationell duerch zwee Mechanismen reglementéiert ass: Polyubiquitinatioun induzéiert vum Phytohormon Gibberellin, wat zu senger schneller Degradatioun féiert, a Konjugatioun vu klenge ubiquitin-ähnlechen Modifizéierer (SUMO) fir seng Akkumulation ze erhéijen. Zousätzlech ass d'DELLA Aktivitéit dynamesch geregelt duerch zwou verschidde Glykosylatiounen: d'DELLA-TF Interaktioun gëtt duerch O-Fukosylatioun verstäerkt awer duerch O-verbonne N-Acetylglucosamin (O-GlcNAc) Modifikatioun hemmt. Wéi och ëmmer, d'Roll vun der DELLA Phosphorylatioun bleift onkloer, well fréier Studien konfliktende Resultater gewisen hunn, rangéiert vun deenen déi weisen datt Phosphorylatioun d'DELLA-Degradatioun fördert oder reduzéiert fir anerer ze weisen datt Phosphorylatioun net seng Stabilitéit beaflosst. Hei identifizéieren mir Phosphorylatiounsplazen am REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) gereinegt vun Arabidopsis thaliana duerch Massespektrometrieanalyse a weisen datt d'Phosphorylatioun vun zwee RGA-Peptiden an de PolyS- a PolyS/T-Regiounen H2A-Bindung fördert a verbessert RGA-Aktivitéit. Association vun RGA mat Zil Promoteuren. Notamment beaflosst Phosphorylatioun keng RGA-TF Interaktiounen oder RGA Stabilitéit. Eis Etude weist de molekulare Mechanismus duerch déi phosphorylation DELLA Aktivitéit induzéiert.
Fir d'Roll vun der Phosphorylatioun bei der Reguléierung vun der DELLA Funktioun z'erklären, ass et kritesch fir DELLA Phosphorylatiounsplazen in vivo z'identifizéieren a funktionell Analysen a Planzen auszeféieren. Duerch Affinitéitsreinigung vu Planzenextrakter gefollegt vun MS / MS Analyse, identifizéiert mir verschidde Phosphositen an RGA. Ënner Bedéngungen vum GA-Defizit erhéicht d'RHA Phosphorylatioun, awer d'Phosphorylatioun beaflosst seng Stabilitéit net. Wichteg, Co-IP a ChIP-qPCR Assays verroden datt Phosphorylatioun an der PolyS /T Regioun vun RGA seng Interaktioun mat H2A a seng Associatioun mat Zilpromotoren fördert, de Mechanismus opzeweisen duerch deen Phosphorylatioun d'RGA Funktioun induzéiert.
RGA gëtt rekrutéiert fir Chromatin ze zielen duerch d'Interaktioun vum LHR1 Subdomain mat TF a bindt dann un H2A duerch seng PolyS / T Regioun an PFYRE Ënnerdomain, a bildt den H2A-RGA-TF Komplex fir RGA ze stabiliséieren. Phosphorylatioun vu Pep 2 an der PolyS /T Regioun tëscht dem DELLA Domain an dem GRAS Domain duerch eng onidentifizéiert Kinase verbessert d'RGA-H2A Bindung. De rgam2A mutant Protein ofschaaft RGA Phosphorylatioun an adoptéiert eng aner Proteinkonformatioun fir mat H2A Bindung ze stéieren. Dëst resultéiert an Destabiliséierung vun transienten TF-rgam2A Interaktiounen an Dissoziatioun vu rgam2A vum Zilchromatin. Dës Figur weist nëmmen RGA-mediated transcriptional Repressioun. Eng ähnlech Muster kéint fir RGA-mediated transcriptional Aktivatioun beschriwwe ginn, ausser datt d'H2A-RGA-TF komplex Zil- Gentherapie Transkriptiouns an dephosphorylation vun rgam2A förderen géif Transkriptiouns erofgoen. Figur geännert aus Huang et al.21.
All quantitativ Donnéeën goufen statistesch mat Excel analyséiert, a bedeitend Differenzen goufen mam Student's t Test bestëmmt. Keng statistesch Methode goufen benotzt fir d'Proufgréisst virleefeg ze bestëmmen. Keng Daten goufen aus der Analyse ausgeschloss; den Experiment war net zoufälleg; d'Fuerscher waren net blann fir d'Verdeelung vun Daten während dem Experiment an der Evaluatioun vun de Resultater. D'Proufgréisst gëtt an der Figurlegend a Quelldatendatei uginn.
Fir méi Informatiounen iwwer den Studiendesign, kuckt den Natural Portfolio Report Abstract, deen zu dësem Artikel gehéiert.
Mass Spektrometrie Proteomics Daten goufen zum ProteomeXchange Konsortium bäigedroen duerch de PRIDE66 Partner Repository mat Datasetidentifizéierer PXD046004. All aner Donnéeën, déi während dëser Etude kritt goufen, ginn an den Ergänzungsinformatioun, Ergänzungsdatendateien a Raw Datedateien presentéiert. Quelldaten gi fir dësen Artikel zur Verfügung gestallt.
Post Zäit: Nov-08-2024